曹秀朋陈霞郭雅图巩一博王雪纯
基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（编号：）；天津市自然科学基金（编号：18JCYBJC）；天津市第三批人才·发展特殊支持计划；天津市卫生系统高层次人才计划（青年医学新锐）
作者单位：天津市，天津医科大学眼科临床学院（曹秀朋，巩一博，王雪纯）；天津市，医院（陈霞，郭雅图）
目的探索枸杞子提取物对人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞C57BL/6J小鼠视网膜光诱导损伤的保护作用。方法ARPE-19细胞分为正常细胞对照组，光诱导细胞损伤组，细胞低、中、高剂量组（0.1g·L-1、0.5g·L-1、1.0g·L-1枸杞子提取物+光诱导细胞损伤），测定各组细胞活力以及细胞内活性氧（ROS）含量的变化。40只C57BL/6J小鼠随机分为正常动物对照组，光诱导动物损伤组，动物低、中、高剂量组（mg·kg-1、mg·kg-1、mg·kg-1枸杞子提取物+光诱导动物损伤组），每组8只。各剂量枸杞子提取物干预组小鼠在6周龄开始给予枸杞子提取物灌胃，8周后再给予lux光照射24h；光照结束后ERG评估各组小鼠视网膜功能，OCT检测视网膜外核层（ONL）厚度，FFA检测视网膜血管渗漏情况，HE染色后对视网膜ONL细胞进行计数，同时检测血清中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果光诱导细胞损伤组ARPE-19细胞活力下降为正常细胞对照组的61.88%，细胞内ROS含量为正常细胞对照组的1.52倍；细胞低、中高剂量组ARPE-19细胞活力较光诱导细胞损伤组均明显上升，细胞内ROS含量均明显下降，并均呈剂量依赖性（均为P0.05）。与动物对照组相比，光诱导动物损伤组小鼠ERG暗适应a波、b波振幅和明适应b波振幅均明显下降，动物低、中、高剂量组各波的振幅均得到不冋程度改善。光诱导动物损伤组小鼠视网膜出现萎缩灶、血管渗漏和血管末端成珠样结构，视网膜ONL厚度变薄，为（52.18±4.23）μm，ONL每列细胞数明显减少，为（17.63±1.30）个；动物低、中、高剂量组小鼠视网膜病理改变及视网膜ONL厚度与ONL每列细胞数均得到不同程度改善，尤其动物高剂量组改善最为明显，ONL厚度为（59.72±2.76）μm，ONL每列细胞数为（20.00±1.51）个，与光诱导动物损伤组相比差异均有统计学意义（P=0.、0.）。相对于光诱导动物损伤组，动物低、中、高剂量组小鼠血清SOD、GSH-Px活性均明显提高，MDA含量均明显下降，且均呈剂量依赖性（均为P0.05）。结论枸杞子提取物可以一定程度上保护视网膜免受光损伤。
枸杞子提取物；光诱导损伤；抗氧化剂；ARPE-19细胞；视网膜
R
年龄相关性*斑变性（age-relatedmaculardegeneration，AMD）是发达国家60岁以上人群视力不可逆性损害的首要原因[1-2]。由于人口日趋老龄化，我国AMD患者日益增多，AMD已成为我国眼科防盲研究的重点课题之一。AMD是一种多因素疾病，会影响视网膜许多类型的细胞，包括脉络膜毛细血管内皮细胞、小胶质细胞、感光细胞和视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium，RPE）细胞[3]。RPE细胞可吸收过多的光以防止视网膜受到光诱导损伤[4-5]。过量的强光会引起RPE细胞的氧化应激从而触发活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS）的产生并产生氧化损伤。光诱导损伤模型早已用于测试抗氧化剂对视网膜的保护作用[6-7]。RPE细胞的氧化损伤已被认为在AMD的发生发展中起重要作用[8-11]。因此，视网膜的光诱导损伤模型可用于研究AMD等视网膜变性类疾病，为AMD的发病机制、治疗措施等的研究提供了良好基础。枸杞子属茄科，已被用作传统中草药数千年[12]，药用植物枸杞主要活性成分为枸杞多糖[13]，是水溶性蛋白质多糖，具有多种功能，包括抗氧化[14]、免疫调节[15]和抗炎[16]。本实验通过细胞和动物实验来评估枸杞子提取物对AMD的早期预防效果。
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近期由于